Lise Roy est comédienne de théâtre, de télévision et de cinéma. L’enseignement occupe une place importante dans son parcours professionnel et après avoir complété une maîtrise en recherche de création, elle occupe maintenant un poste de professeur d’interprétation à l’École supérieure de théâtre de l’Université du Québec à Montréal (UQAM).
Au théâtre, on la remarque pour son interprétation de Camille Claudel dans le spectacle Camille C et pour une puissante Élisabeth 1ère dans Marie Stuart (m.e.s. de Alexandre Marine). D’autres spectacles marquent sa présence au théâtre dont Top Girls (m.e.s. de Martine Beaulne), La Casa azul et La Géométrie des miracles (m.e.s. de Robert Lepage), Le Bruit des os qui craquent (m.e.s. de Gervais Gaudreault), Tom à la ferme (m.e.s. de Claude Poissant), Les Bonnes (m.e.s. de Marc Béland), Les robots fonts-ils l'amour? (m.e.s Angela Konrad), dans le plus récent succès La meute (m.e.s Marc Beaupré) et dans la pièce Golgotha picnic, mise en scène par Angela Konrad. En 2014, elle produit la création théâtrale Je ne suis jamais en retard ; ce spectacle implique près de vingt femmes, auteures, conceptrices et comédiennes. Au cours des années, elle participe à de nombreuses tournées au Québec avec le TPQ, en Europe et aux États-Unis avec la cie Ex Machina, et en France et au Mexique avec le Théâtre le Carrousel.
Elle est de plusieurs séries télévisées, notamment Toute la vérité, Les invincibles, Nouvelle adresse, Victor Lessard, Les invisibles, Bête noire, La faille 3, Une affaire criminelle et Les bombes. On l’a vue au cinéma dans Les Invasions Barbares, Le Secret de ma mère, Peau Blanche, À l’origine d’un cri et dans Tom à la ferme, rôle pour lequel elle remporte le prix de "Best Supporting Actress in a Canadian Film" décerné par le Vancouver Film Critics Circle et une nomination comme meilleure actrice au Jutra 2015. Elle reçoit aussi le Prix Gemini de la meilleure actrice dans un rôle de soutien pour The Boys of St-Vincent ainsi qu’une mise en nomination pour son interprétation de Miss Lafleur dans Children of my heart.