Lise Roy est comédienne de théâtre, de télévision et de cinéma. L’enseignement a occupé une place importante dans son parcours professionnel et après avoir complété une maîtrise en recherche de création, elle a enseigné pendant plusieurs années à l’École supérieure de théâtre de l’Université du Québec à Montréal (UQAM).
Au théâtre, elle a récemment participé à une lecture de Que notre joie demeure (m.e.s. Angela Konrad). On a également pu la remarquer pour son interprétation de Camille Claudel dans le spectacle Camille C et pour une puissante Élisabeth Ire dans Marie Stuart (m.e.s. Alexandre Marine). D’autres spectacles marquent sa présence au théâtre dont Top Girls (m.e.s. Martine Beaulne), La Casa azul et La Géométrie des miracles (m.e.s. Robert Lepage), Le Bruit des os qui craquent (m.e.s. Gervais Gaudreault), Tom à la ferme (m.e.s. Claude Poissant), Les Bonnes (m.e.s. Marc Béland), Les robots fonts-ils l'amour? et Golgotha picnic (m.e.s. Angela Konrad), ainsi que le plus récent succès, La meute (m.e.s. Marc Beaupré). En 2014, elle produit la création théâtrale Je ne suis jamais en retard ; ce spectacle implique près de vingt femmes, auteures, conceptrices et comédiennes. Au cours des années, elle participe à de nombreuses tournées au Québec avec le TPQ, en Europe et aux États-Unis avec la cie Ex Machina, et en France et au Mexique avec le Théâtre le Carrousel.
On l’a vue au cinéma dans Lucy, Grizzli, Sophie réalisé par Anne Émond et dans Les Invasions Barbares, Le Secret de ma mère, Peau Blanche, À l’origine d’un cri et dans Tom à la ferme, rôle pour lequel elle remporte le prix de "Best Supporting Actress in a Canadian Film" décerné par le Vancouver Film Critics Circle et une nomination comme meilleure actrice au Jutra 2015. Elle reçoit aussi le Prix Gemini de la meilleure actrice dans un rôle de soutien pour The Boys of St-Vincent ainsi qu’une mise en nomination pour son interprétation de Miss Lafleur dans Children of my heart. Elle est également de plusieurs séries télévisées, notamment Toute la vérité, Les invincibles, Nouvelle adresse, Victor Lessard, Les invisibles, Bête noire, La faille 3, Une affaire criminelle et Les bombes.