Au théâtre, Louis-Olivier Mauffette a incarné plus d’une vingtaine de rôles sous la direction de metteurs en scène chevronnés comme Jacques Rossi, Un simple soldat (TDP), Martin Genest, Octobre 70 (Théâtre Blanc), Michèle Deslauriers, Devinez qui? (La Comédie humaine) et Justin Larramée, Transmissions (La Licorne). Il était de la distribution du spectacle Notre petite ville, en tournée partout au Québec, de la pièce Televizione (Théâtre de Quat’sous), mise en scène par Sébastien Dodge. Il a contribué au grand succès de la pièce pour ados On t’aime Mickaël Gouin, sur les planches du Théâtre des Cascades, dans une mise en scène de Dominic Quarré et sur les routes du Québec par la suite. Il est aussi de la distribution de L'embardée mis en scène par Jean-Simon Traversy et de Silence, on tourne!, mise en scène de Charles Dauphinais (Théâtre Gilles Vigneault et en tournée).
Au petit écran, il se fait confier des rôles dans Les invincibles,Unité 9, Toute la vérité, Olivier, O', L'Échappée, Caméra Café 2.0., Sans Rendez-Vous et L’Oeil du cyclone. Il a incarné les personnages de Sansouci et Oncle Phil dans la populaire série jeunesse L’appart du 5e. Louis-Olivier fait sa marque dans la websérie et série télé Papa I et II, écrite et réalisée par Jonathan Roberge, en plus d’être la tête d’affiche de Gazébo, série web qu’il a co-scénarisée et qui fut nommée au Gémeaux en 2022 dans la catégorie "Meilleur texte pour une émission ou série produite pour les médias numériques : comédie pour Gazebo".
